服务案例

公司与西北农林大学合作，开发“植物超薄切片虚拟仿真实验”课程。

一、实验目的

1、掌握超薄切片取样方法，掌握前固定的方法。

2、掌握超薄切片固定和脱水的方法。

3、掌握浸透、包埋、聚合的方法。

4、掌握修块、切片的方法。

5、掌握超薄切片机的使用。

6、掌握超薄切片的染色方法。

二、实验原理

生物组织从活体上取下来，会有细胞自溶现象，因此需要用化学或者物理方法迅速杀死植物细胞、组织，使细胞、组织的形态结构尽可能保持在接近生活时的状态，才能揭示植物组织或细胞真正的结构。经固定的材料制片后细胞或组织不易破坏，而且能显示原来的细微结构。

超薄切片材料一般采用双重固定法，在低温条件下先用戊二醛进行前固定，再用锇酸进行后固定。

急骤的脱水会引起细胞的收缩，因此，脱水由低到高梯度进行。

常用的包埋剂是环氧树脂，添加一定比例的催化剂、固定剂和软化剂崇恩混匀后配成包埋剂。

修块是为了出去组织块周围多余的包埋介质或费研究用的材料部位，使要切的部位硬度一致，保证切出好的切片。样品修成平顶的金字塔形，是为了让样品在切片过程中得到最佳的支持力。

未经染色的超薄切片，反差很弱。因此要进行染色出来，以增强样品的反差。一般是用重金属盐与组织细胞中某些成分结合或被组织吸附来达到染色的目的。重金属的原子对电子束形成散射，从而提高图像的反差。

三、实验内容

该实验分为5个模块：

模块一：超薄切片-取材与前固定

模块二：超薄切片-冲洗、后固定、冲洗与脱水

模块三：超薄切片-浸透、包埋、聚合

模块四：超薄切片-修块、切片、捞片

模块五：超薄切片-染色与镜检