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西北农林大学:植物石蜡切片虚拟仿真实验

时间:2021-06-25   访问量:2281

公司与西北农林大学合作,开发植物石蜡切片虚拟仿真实验课程。

一、实验目的

1、掌握采样及样品分割方法。

2、了解常见固定液的种类和配方,学习固定的方法。

3、了解样品冲洗方法和掌握整体染色方法。

4、掌握脱水的方法,透明的方法及浸蜡的方法。

5、掌握包埋的方法。

6、掌握切片、粘片的方法,掌握旋转切片机的结构及使用方法。

7、掌握二重染色及封片的方法。

二、实验原理

根据研究需要选择合适的材料及部位,用化学或者物理的方法迅速杀死植物细胞、组织,使细胞、组织的形态结构尽可能保持在接近生活时的状态,才能揭示植物组织或器官真正的结构。经固定的材料制片后细胞或组织不易损坏,而且能显示原来的细微结构。

石蜡切片法采用化学固定法。固定的材料必须新鲜,取材后马上固定。含有气泡的材料投入固定液后,材料不会下沉,故须将气泡抽出,使材料下沉。

常用FAA固定液,卡诺固定液。

材料与固定液的比例以120为宜。

001.png

染色是使用一种染料(单染),或者几种不同的染料(复染)使不同的组织显示出同一种或不同的颜色,便于显微观察。

脱水应逐级进行,由低浓度到高浓度。材料在各级乙醇中停留的时间按材料大小和性质而定,一般停留30 min-2 h

石蜡在60℃烘箱中使熔化的,液态石蜡浸入细胞或者组织中,低于熔点石蜡会迅速凝固,和材料凝固后融为一个整体,有利于在切片机上切成薄片。

三、实验内容

该实验共包括6个模块:

模块一:石蜡切片-取材与固定

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模块二:石蜡切片-冲洗、复水和苯胺番红整染

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模块三:石蜡切片-脱水、透明、浸蜡

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模块四:石蜡切片-包埋

图片4.png

 

模块五:石蜡切片-切片、粘片、展片与烤片

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模块六:石蜡切片-脱蜡、复染与封片及观察

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