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(一)内容介绍
本虚拟仿真实验分为3个模块,模块1,CaCO3@COF-BODIPY-2I@GAG的合成及其表征;模块2,体外实验;模块3,体内实验。
模块1,CaCO3@COF-BODIPY-2I@GAG的合成及其表征
(1)TPB-DMTP-COF的合成
以DMTP和TPB为原料,经加热搅拌、离心、洗涤和干燥制备得到黄色发光粉末TPB-DMTP-COF。
(2)BODIPY-2I的合成
经加热搅拌、硅胶柱提纯、旋蒸、干燥、回流等操作,制备得到深红色粉末BODIPY-2I。
(3)COF-BODIPY-2I的合成
以BODIPY-2I为原料,经加热搅拌、离心、洗涤和干燥制备得到橙色粉末COF-BODIPY-2I。
(4)CaCO3@COF-BODIPY-2I的合成
以COF-BODIPY-2I为原料,经搅拌、离心、洗涤和超声等操作,制备得到橙黄色粉末CaCO3@COF-BODIPY-2I 。
(5) CaCO3@COF-BODIPY-2I@GAG的合成
以CaCO3@COF-BODIPY-2I为原料,经搅拌、离心、洗涤和干燥制备得到橙黄色粉末CaCO3@COF-BODIPY-2I@GAG 。
(6)结构表征
可自由选择需要进行表征的药品和表征方法。
(7)光照下单态氧的测定
使用紫外分光光度计进行光照下单态氧的测定。
(8)光照下Ca2+释放的测定
使用Calcium Assey试剂盒进行光照下Ca2+释放的测定。
模块2,体外实验
(1)SOSG染色法测定细胞内单线态氧
使用SOSG染色法测定HCT-116细胞内单线态氧。
(2)Fluo-4/AM染色测定细胞内钙离子浓度
使用Fluo-4/AM染色测定HCT-116细胞内钙离子浓度。
(3)CCK-8体外细胞毒性评价
使用CCK-8法对体外细胞进行毒性评价。
模块3,体内实验
向小鼠肿瘤注射药品,使用LED灯照射肿瘤,测试体内抗肿瘤作用。
(二)实验的特色和亮点
钙离子(Ca2+)是细胞内负责信号传导的第二信使,参与多种生理事件的调节。钙稳态失调,例如Ca2+浓度的异常升高,将触发氧化应激和内质网应激,进而导致细胞死亡。因此,通过钙过载破坏肿瘤细胞钙稳态是抗肿瘤治疗的潜在手段之一。光动力治疗可以通过1O2诱导的氧化应激直接导致肿瘤细胞死亡。在线粒体失去Ca2+调节功能的情况下,通过将外源Ca2+递送至细胞内,可以很容易地实现细胞内钙过载。通过这种方式,光动力治疗和由1O2触发的钙过载将巧妙地整合在一起:即使在较温和的PDT条件下,也可以实现更有效的抗肿瘤治疗。本实验基于共价有机框架(COFs)纳米材料、BODIPY-2I光敏剂、CaCO3纳米颗粒、葡胺聚糖(GAG)涂层构成的CaCO3@COF-BODIPY-2I@GAG复合纳米材料,并将其用于联合钙过载和光动力的抗肿瘤靶向治疗。